ABSTRACT
BACKGROUND/AIMS: JX-594 is an oncolytic virus derived from the Wyeth vaccinia strain that causes replication-dependent cytolysis and antitumor immunity. Starting with a cross-examination of clinical-trial samples from advanced hepatocellular carcinoma patients having high levels of aldosterone and virus amplification in JX-594 treatment, we investigated the association between virus amplification and aldosterone in human cancer cell lines. METHODS: Cell proliferation was determined by a cell-counting-kit-based colorimetric assay, and vaccinia virus quantitation was performed by quantitative polymerase chain reaction (qPCR) and a viral plaque assay. Also, the intracellular pH was measured using a pH-sensitive dye. RESULTS: Simultaneous treatment with JX-594 and aldosterone significantly increased viral replication in A2780, PC-3, and HepG2 cell lines, but not in U2OS cell lines. Furthermore, the aldosterone treatment time altered the JX-594 replication according to the cell line. The JX-594 replication peaked after 48 and 24 hours of treatment in PC-3 and HepG2 cells, respectively. qPCR showed that JX-594 entry across the plasma membrane was increased, however, the changes are not significant by the treatment. This was inhibited by treatment with spironolactone (an aldosterone-receptor inhibitor). JX-594 entry was significantly decreased by treatment with EIPA [5-(N-ethyl-N-isopropyl)amiloride; a Na+/H+-exchange inhibitor], but aldosterone significantly restored JX-594 entry even in the presence of EIPA. Intracellular alkalization was observed after aldosterone treatment but was acidified by EIPA treatment. CONCLUSIONS: Aldosterone stimulates JX-594 amplification via increased virus entry by affecting the H+ gradient.
Subject(s)
Animals , Humans , Rabbits , Aldosterone/pharmacology , Mineralocorticoid Receptor Antagonists/pharmacology , Amiloride/analogs & derivatives , Carcinoma, Hepatocellular/blood , Cell Line, Tumor , Hydrocortisone/blood , Hydrogen-Ion Concentration , Liver Neoplasms/blood , Neuroprotective Agents/pharmacology , Oncolytic Virotherapy , Spironolactone/pharmacology , Vaccinia virus/drug effects , Virus Replication/drug effectsABSTRACT
Seventy three marine plant extracts were tested in vitro in chick embryo fibroblast cell culture and their anti-vaccinia virus activity was evaluated in terms of reduction in number of plaques by the extracts. Only seven extracts were found to show the activity. Sargassum wightii, a seaweed had the highest activity, reducing 65 per cent of plaques formed by vaccinia virus.
Subject(s)
Animals , Antiviral Agents/pharmacology , Cells, Cultured , Chick Embryo , India , Plant Extracts , Seawater , Vaccinia virus/drug effectsABSTRACT
La eliminación mundial del virus de la viruela con el virus de la vaccinia fue un proceso que duró poco más de siglo y medio, que se desarrolló en varias etapas según la aceptación del procedimiento, de los adelantos técnicos y del esfuerzo colaborativo de las autoridades internacionales de salud con los representantes en cada uno de los países del mundo. El virus de la vaccinia es asimétrico y está recubierto por una membrana obtenida cuando el virus maduro sale de la célula infectada. Tiene la forma de un ladrillo y es muy resistente a los efectos de los inactivadores físicos y químicos. La certificación definitiva de la erradicación mundial de la viruela fue hecha por la Asamblea Mundial de la Salud en mayo de 1980; con esto el virus de la vaccinia parecía también haber quedado condenado a la extinción. Sin embargo, la comunidad científica se volvió a fijar en él a consecuencia del desarrollo de la tecnología del DNA recombinante, cuando surgió la posibilidad de romper la barrera genética de los organismos y se logró la recombinación de genomas de cualquier especie. Si el agente infeccioso no es patogénico y el gene proviene de otro agente que si lo es, entonces ese vector de expresión se puede utilizar con una vacuna prácticamente ideal, ya que puede inmunizar al sujeto contra ese patógeno, sin peligro para la salud. Uno de los más lógicos candidatos a servir como vector fue el virus de la vaccinia, debido a que sus cualidades inmunogénicas y de seguridad son excelentes ya que su genoma puede incorporar una cantidad importante de DNA, por lo menos 25,000 pares de bases, sin por ello perder su inefectividad. El virus de la vaccinia cuenta ahora con enormes posibilidades para continuarse usando, ya no como medida profiláctica, específica o no, sino como un vehículo seguro y eficiente de material genético de otros agentes infecciosos